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Espressione di proteine fluorescenti Interazione di proteine Semi di Arabidopsis Single Cell System

PIATTAFORMA PIANTE


Descrizione generale

La piattaforma piante si configura come centro per raccogliere, implementare e diffondere tecniche e tecnologie legate allo studio delle piante. Il personale tecnico coinvolto mette a disposizione le proprie competenze ai gruppi di ricerca del DBS, interessati ad usufruire dei servizi erogati. La piattaforma fornisce un servizio di seed bank per la conservazione del germoplasma di ecotipi, cultivar o mutanti a temperatura e umidità controllate. L’elenco dei semi disponibili è consultabile a questo link. Inoltre, fornisce un servizio di plasmid repository dedicato a cloni di interesse per l’area piante, in collaborazione e con l’ausilio della piattaforma di microbiologia.


Descrizione del servizio/servizi offerti

La piattaforma piante è intesa come servizio dipartimentale per tutti i gruppi di ricerca del DBS, inclusi quelli che, pur non lavorando normalmente con le piante, vorrebbero usarle una tantum per specifici esperimenti.

Il personale della piattaforma è in grado di dare supporto per

  • Preparazione di vettori per trasformazione stabile o transiente,
  • Trasformazione stabile di Arabidopsis thaliana,
  • Trasformazione transiente tramite VIGS,
  • Produzione di mutanti transienti (utilizzando Agrobacterium) in Nicotiana benthamiana per analisi di espressione, localizzazione o interazione in vivo (tecniche microscopiche o CoIP);
  • Analisi di espressione proteica e interazione proteina/proteina in pianta e in organismi eterologhi tramite pull-down o CoIP,
  • Analisi del profilo polisomiale: estrazione e frazionamento polisomi ed estrazione dell’RNA dalle singole frazioni,
  • Analisi del profilo di espressione di trascritti tramite ibridazione in situ,
  • Training di tesisti, dottorandi, post-doc, al fine di trasferire competenze,
  • Fornire consulenza e competenze tecniche per la progettazione e la messa a punto di nuovi progetti di ricerca in ambito vegetale. 

Il personale semina regolarmente e mantiene piante di Nicotiana benthamiana per trasformazione transiente e piante di Arabidopsis thaliana (ecotipo Col-0) per trasformazione stabile tramite floral dip.

 

Infine, il personale è a disposizione per acquisire nuovi protocolli e tecniche, arricchendo l’offerta di competenze della piattaforma. Questi progetti devono essere discussi con i tecnici e i responsabili della piattaforma, per garantire un’introduzione graduale di nuove metodiche.


Descrizione dell'attrezzatura presente

La piattaforma è equipaggiata con i seguenti strumenti:

  • Camera termostatata e ad umidità controllata per conservazione semi
  • Congelatore -20°C
  • Frigorifero
  • Centrifuga refrigerata per falcon, eppendorf e piastre
  • Centrifuga non-refrigerata per falcon, eppendorf e piastre
  • Apparato per SDS-Page e Western Blot
  • Apparato per elettroforesi su gel di agarosio
  • Incubatore agitatore per colture cellulari
  • Incubatore per piastre (stufa)
  • Piccola strumentazione da banco (vortex, piastra rotante, agitatore riscaldante, agitatore a ruota, piccola centrifuga per spinnate)
  • Microonde
  • Set di pipette

 

Il Dipartimento co-finanzia il mantenimento della piattaforma, per mantenerla in efficienza. A tale riguardo si precisa che gli strumenti della piattaforma piante sono strumenti dipartimentali, accessibili anche al di fuori del contesto di utilizzo della piattaforma stessa. Gli utenti interessati possono rivolgersi al personale della piattaforma per l’accesso a tali strumenti.



Per richiedere informazioni contatta piattaforma.piante(at)unimi.it





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